標本的放大主要由物鏡完成，物鏡放大倍數越大，它的焦距越短。焦距越小，物鏡的透鏡和玻片間距離也小。油鏡的工作距離很短，使用時需格外注意。目鏡只起放大作用，不能提分辨率，標準目鏡的放大倍數是十倍。聚光鏡能使光線照射標本后進入物鏡，形成個大角度的錐形光柱，因而對提物鏡分辨率是很重要的。聚光鏡可以上下移動，以調節光的明暗，可變光闌可以調節入射光束的大小。
顯微鏡用光源，自然光和燈光都可以，以燈光較好，因光色和強度都容易控制。般的顯微鏡可用普通的燈光，質量的顯微鏡要用顯微鏡燈，才能充分發揮其性能。有些需要很強照明，如暗視野照明、攝影等，常常使用鹵素燈作為光源。光學顯微鏡是由光學放大系統和機械裝置兩部分組成。
原理：顯微鏡的放大效能是由所用光波長短和物鏡數值口徑決定，縮短使用的光波波長或增加數值口徑可以提分辨率，可見光的光波幅度比較窄，紫外光波長短可以提分辨率，但不能用肉眼直接觀察。所以利用減小光波長來提光學顯微鏡分辨率是有限的，提數值口徑是提分辨率的理想措施。顯微鏡總的放大倍數是目鏡和物鏡放大倍數的乘積，而物鏡的放大倍數越，分辨率越。
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