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凝膠成像分析系統(tǒng)分析詳解
  • 發(fā)布日期:2018-05-22     信息來源:公司新聞      瀏覽次數(shù):3474
    •    凝膠成像分析系統(tǒng)分析詳解

        凝膠成像分析系統(tǒng)用于對電泳凝膠圖像的分析研究,采用數(shù)字?jǐn)z像頭將置于暗箱內(nèi)的電泳凝膠在紫外光或白光照射下的影像取進(jìn)計算機,通過相應(yīng)的凝膠分析軟件,可一次性完成DNA、RNA、蛋白凝膠、薄層層析板等圖像的分析,zui終可得到凝膠條帶的峰值、分子量或堿基對數(shù)、面積、高度、位置、體積或樣品總量。
        從整體總的來說凝膠成像分析系統(tǒng)可應(yīng)用于:蛋白質(zhì)、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分離純化結(jié)果作定性分析。
        1、分子量定量
        對于一般常用的DNA膠片,利用分子量定量功能,通過對膠上DNA Marker條帶的已知分子量注釋,自動生成擬合曲線,并以它衡量得到未知條帶的分子量。通過這種方法所得到的結(jié)果較肉眼觀察估計要準(zhǔn)確很多。
        2、凝膠成像分析系統(tǒng)密度定量
        一般常用的測定DNA和RNA濃度的方法是紫外吸收法,但它只能測定樣品中的總核苷酸濃度,而不能區(qū)分各個長度片段的濃度。利用凝膠成像系統(tǒng)和軟件,先將DNA膠片上某一已知其DNA含量的標(biāo)準(zhǔn)條帶進(jìn)行密度標(biāo)定以后,可以方便的單擊其他未知條帶,根據(jù)與已知條帶的密度做比較,可以得到未知DNA的含量。此方法也適用于對PA GE蛋白膠條帶的濃度測定。
        3、密度掃描
        在分子生物學(xué)和生物工程研究中,凝膠成像分析系統(tǒng)我們zui常用到的是對蛋白表達(dá)產(chǎn)物占整個菌體蛋白的百分含量的計算。傳統(tǒng)的方法就是利用的密度掃描,但利用生物分析軟件結(jié)合現(xiàn)在實驗室常規(guī)配備的掃描儀或者直接用白光照射的凝膠成像分析系統(tǒng)就能完成此項工作。
        4、PCR定量
        PCR定量主要是指,如果PCR實驗擴增出來的條帶不是一條,那么可以利用軟件計算出各個條帶占總體條帶的相對百分?jǐn)?shù)。就此功能而言,與密度掃描類似,但實際在原理上并不相同。PCR定量是對選定的幾條帶進(jìn)行相對密度定量并計算其占總和的百分?jǐn)?shù),密度掃描時并對選擇區(qū)域生成縱向掃描曲線圖并積分。
        凝膠成像分析系統(tǒng)種類:
        1、普通凝膠成像分析系統(tǒng)系:可以對蛋白電泳凝膠,DNA凝膠樣品進(jìn)行圖象采集并進(jìn)行定性和定量分析。
        2、化學(xué)發(fā)光成像分析系統(tǒng):成像范圍涵蓋UV、EB、化學(xué)發(fā)光、紫外-熒光、有色及可見樣品成像。
        3、多色熒光凝膠成像分析系統(tǒng):成像范圍涵蓋UV、EB、化學(xué)發(fā)光、多色熒光熒光、有色及可見樣品成像。
        4、多功能活體成像分析系統(tǒng):UV、EB、化學(xué)發(fā)光、多色熒光熒光、有色及可見樣品成像和離體組織和小型動物,及大型型動物。

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